الملخص
اجریت هذه الدراسة بهدف عزل فایروس موزائیک الخیارCucumber mosaic virus وتشخیصه اعتماداً على خصائصه المصلیة والبایولوجیة والجزیئیة. اذ جمعت عینات من اوراق نباتات خیار ظهرت علیها اعراض موزائیک من البیوت البلاستیکیة العائدة لقسم وقایة النبات-کلیة علوم الهندسة الزراعیة/جامعة بغداد فی الجادریة وتم استعمالها فی اجراء عدوى على نباتات الخیار ونباتات مشخصة اخرى. کذلک فحصت العینات مصلیا بوساطة نقانة ELISA وباستعمال عدة فحص تجاریة متخصصة بفایروس موزائیک الخیار. شخص الفایروس جزیئیا باستعمال تقانة تفاعل انزیم البلمرة والنسخ الرجعی RT-PCR بوجود بوادئ متخصصة بفایروس موزائیک الخیار تستهدف جین الغلاف البروتینی للفایروس وحدد التسلسل النیوکلیوتیدی لقطع DNA المضخمة وحللت باستعمال برامجیات الحاسوب. اکدت نتائج اختبارات العدوى تشخیص فایروس موزائیک الخیار فی عینة خیار ظهرت علیها اعراض الموزائیک والتی تمثلت بظهور اعراض بقع موضعیة متنخرة على اوراق نباتات اللوبیاء المعداة . مصلیا، أمکن تشخیصها بواسطة عدة فحص الیزا التجاریة من الکشف عن الفایروس فی العینة المختبرة عندما حققت شدة التغیر فی اللون اعلى قیمة امتصاص على طول موجی 405 نانومتر بلغت 2.907 . جزیئیا، تم تضخیم قطع DNA المستهدفة ذات الوزن الجزیئی ~ 500 زوج قاعدی والمتخصصة بفایروس موزائیک الخیار باستعمال طقم البوادئ CMV-F/ CMV-R المتخصص. اکدت نتائج التحلیل النیوکلیوتیدی ان قطعة DNA ذات الوزن الجزیئی ~500 المضخمة من عینة الخیار بوساطة CMV-F/CMV-R ا تعود الى جین الغلاف البروتینی لفایروس موزائیک الخیار لدى مقارنتها مع التسلسلات المکافئة المودعة فی بنک الجینات NCBI عند مستوى التسلسلین النیوکلیوتیدی والحامض الامینی ، اذ حققت هذه العزلة اعلى نسب تطابق نیوکلیوتیدی وامینی وصلت الى 95% و 91 % على الترتیب مع عزلات الهند والیابان والصین والولایات المتحدة الامریکیة العائدة الى فایروس موزائیک الخیار ( عزلات الهند (MN380719.1) والیابان (AB119091.1، LC066446.1، LC066431.1، LC500133.1) والصین (MH119158.1 ، MG025949.1 ، KT302193.1 ، KT302175.1 ، EF159146.1، MT108233.1، MH119170.1 ، MH119154.1) والولایات المتحدة الامریکیة (AF523345.1) . وضعت شجرة الأصول الوراثیة من نوع الضامة بالتجاور التی تم بناؤها من التسلسلات النیوکلیوتیدیة الجزئیة لجین الغلاف البروتینی لعزلة فایروس عینة الخیار مع نظیراتها فی بنک الجینات مما یشیر الى انها قد انحدرت من أصل مشترک مؤکدة ان عزلة الخیار قید الدراسة تعود الى فایروس موزائیک الخیار Cucumber mosaic virus.
الكلمات الرئيسة
الموضوعات